车载式孢子捕捉仪在展示外源蛋白技术中的应用

来源:电锅炉厂家   日期:2020-01-08 08:51:10
  枯草芽胞杆菌是益生菌,已用做食品、动物饲料和水产养殖添加菌。枯草芽胞杆菌目前研究较为详尽,常被用来作为外源基因表达的宿主。但是枯草芽胞杆菌作为外源蛋白的表达宿主还面临着一系列的问题,如:构建的质粒不太稳定,自身分泌蛋白酶较多等。近新兴了一种利用车载式孢子捕捉仪捕捉枯草芽胞杆菌的孢子展示外源蛋白的技术。
 
  相对于把蛋白或多肽片段展示在噬菌体或细菌营养细胞、酵母细胞表面,车载式孢子捕捉仪得到的孢子表面展示具有以下优点:
  先,当用噬菌体或细菌营养细胞、酵母细胞作为表面展示载体时,外源蛋白必须穿过细胞膜,这就要求外源蛋白表达后必须快速在细胞质内折叠且具有疏水序列,从而顺利通过细胞膜,而很多蛋白并不具有以上特征,但是枯草芽胞杆菌孢子的形成是内生的,展示在孢子表面的外源蛋白并不需要穿过细胞膜。
  其次,车载式孢子捕捉仪收集的孢子具有独特的抗逆性,可以抵抗高温、强酸、强碱、辐射等不良环境的影响而长时间存活,人们曾经从2500~4000万年前琥珀内的蜜蜂肠道中发现一枚具有萌发为正常营养细胞能力的芽胞。
车载式孢子捕捉仪捕捉枯草芽胞杆菌展示
  使用车载式孢子捕捉仪捕捉到的枯草芽胞杆菌孢子表面有数个可以用于表面展示的孢子衣壳蛋白,这就为把多聚体蛋白展示在其表面提供了条件;后,其胞内有一套完整的需要消耗ATP的分子伴侣体系,在芽胞的形成过程中,不仅可以帮助自身蛋白正确折叠,还可以帮助连接在衣壳蛋白上的外源蛋白正确折叠。